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一文解鎖ELISA檢測方法

發(fā)布時(shí)間:2023-11-09     發(fā)布作者:上海通蔚生物

  對于剛接觸這方面科研類的人群對ELISA檢測比較陌生,那么,ELISA檢測方法有哪些?今天由通蔚生物為大家詳細(xì)介紹一下。

  ELISA又叫酶聯(lián)免疫吸附測定法(英文簡稱,ELISA)的簡稱。它是在免疫酶技術(shù)基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種新型的免疫測定技術(shù)。


ELISA檢測


  認(rèn)識免疫酶技術(shù)?


  免疫酶技術(shù)是一種免疫檢測技術(shù),它結(jié)合了抗原抗體反應(yīng)的特異性和酶有效催化反應(yīng)的專一性。該技術(shù)將酶與抗體或抗原結(jié)合成酶標(biāo)記抗體或抗原,此結(jié)合物既保留了抗體或抗原的免疫學(xué)活性,同時(shí)又保留了酶對底物的催化活性。它以酶作為標(biāo)記物,與抗體或抗原聯(lián)結(jié),與相應(yīng)的抗原或抗體作用后,通過底物的顏色反應(yīng)作抗原抗體的定性和定量,亦可用于組織中抗原或抗體的定位研究,即酶免疫組織化學(xué)技術(shù)。

  ELISA檢測方法4種方法


  • 直接法(Direct ELISA):將抗原直接固定在固相載體上,加入酶標(biāo)記的一級抗體,即可測定抗原總量。此一級抗體的特異性非常重要。
     優(yōu)勢:操作手續(xù)簡短,因無須使用二抗可避免交互反應(yīng)。
  • 間接法(Indirect ELISA):此測定方法與直接法類似,差別在于一級抗體沒有酶標(biāo)記,改用酶標(biāo)記的二級抗體去辨識一級抗體來測定抗原量。
     優(yōu)勢:二抗可以加強(qiáng)信號,而且有多種選擇能做不同的測定分析。不加酶標(biāo)記的一級抗體則能保留它多的免疫反應(yīng)性。缺點(diǎn):交互反應(yīng)發(fā)生的幾率較高。
  • 雙抗體夾心法(Sandwich ELISA):被檢測的抗原包被在兩個(gè)抗體之間,其中一個(gè)抗體將抗原固定于固相載體上,即捕捉抗體。另一個(gè)則是檢測抗體,此抗體可用酶標(biāo)記后直接測定抗原的量;或不標(biāo)記,再透過酶標(biāo)記的二級抗體來測定抗原的量。
  • 競爭法(Competitive ELISA):此方法整體敏感性和專一性都較差。


ELISA檢測方法


  檢測過程注意事項(xiàng):


  1.   操作要規(guī)范,以減少交叉污染和誤差。
  2.   確保所有試劑和設(shè)備均處于良好狀態(tài)。
  3.   標(biāo)準(zhǔn)曲線的構(gòu)建和測定要精確,以保證待測樣品的濃度準(zhǔn)確。

  上文由通蔚生物為大家介紹了ELISA及檢測方法,希望對您在ELISA檢測過程有所幫助。如果對上文還有疑問不懂可以和通蔚在線客服溝通,我們會幫您解答。